تبلیغات
باشگاه پژوهشگران جوان - کروماتوگرافی مایع با کارائی بالا (HPLC)
باشگاه پژوهشگران جوان
باشگاه پژوهشگران جوان

لینکدونی

آرشیو موضوعی

آرشیو

لینکستان

صفحات جانبی

← آمار وبلاگ

  • کل بازدید :
  • بازدید امروز :
  • بازدید دیروز :
  • بازدید این ماه :
  • بازدید ماه قبل :
  • تعداد نویسندگان :
  • تعداد کل پست ها :
  • آخرین بازدید :
  • آخرین بروز رسانی :

کروماتوگرافی مایع با کارائی بالا (HPLC)

کروماتوگرافی مایع یکی از انواع کروماتوگرافی است که فاز متحرک در آن مایع است. کروماتوگرافی گازی نیز روش دیگری است که در آن فاز متحرک گاز است. اگر فاز متحرک گاز و فاز ساکن مایع باشد، روش را کروماتوگرافی گاز- مایع می‌نامند. روش‌های کروماتوگرافی گاز- جامد، مایع- مایع و مایع- جامد نیز وجود دارند.در HPLC اغلب از ستون‌های پر شده با ذرات ریز فاز ساکن استفاده می‌شود. به همین علت سطح بیشتری از فاز ساکن در ستون در معرض اجزاء نمونه قرار می‌گیرد و در نتیجه راندمان جداسازی در این روش بیشتر از سایر روش‌های کروماتوگرافی است.

کروماتوگرافی مایع با کارائی بالا (HPLC)
تسوت، گیاه شناس روسی به عنوان کاشف پدیده کروماتوگرافی شناخته شده است. او در اواخر قرن نوزدهم برای جداسازی رنگدانه‌های برگ سبز از یک ستون پرشده با کلسیم کربنات استفاده نمود. پس از او، دانشمندان زیادی در توسعه تئوری و روش کروماتوگرافی نقش داشته‌اند. از جمله مارتین و سینج که به علت توصیف کروماتوگرافی تقسیمی موفق به اخذ جایزه نوبل در سال 1952 شدند. در همان سال مارتین به همراه جیمز روش کروماتوگرافی گاز- مایع را معرفی نمود. تلاش‌ها و کوشش‌های این دانشمندان باعث گردید تا امروزه این روش به عنوان یکی از مهمترین روش‌های کروماتوگرافی در تمامی شاخه‌های شیمی و علوم زیستی مطرح شود.
واژه کروماتوگرافی امروزه به دسته‌ای از روش‌ها اطلاق می‌شود که در آنها جداسازی اجزاء موجود در یک نمونه مخلوط، بر اساس تمایل نسبی هر جزء به فاز ساکن هنگام عبور فاز متحرک از روی و یا درون فاز ساکن است. گونه‌ای که تمایل بیشتری به فاز متحرک دارد با سرعت بیشتری حرکت ‌می‌کند و بالعکس گونه‌ای که به فاز ساکن تمایل بیشتری دارد، با سرعت کمتری در طول ستون حرکت می‌کند.
به علت آن که مواد با درجات گوناگون به فازهای ساکن تمایل دارند، می‌توان از این خاصیت جهت جداسازی آنها از یکدیگر استفاده نمود. زمان مورد نیاز برای حرکت هر جزء در فاصله مشخص را می‌توان برای تجزیه‌های کیفی به کار برد. همچنین مقدار اندازه‌گیری شده برای هر جزء جدا شده نیز جهت تجزیه کمی سودمند است.
کروماتوگرافی با توجه به طبیعت فازهای ساکن و متحرک به دسته‌های مختلفی تقسیم می‌شود. برخی از روش‌های متداول کروماتوگرافی در جدول 1 ذکر شده است.

جدول 1- روش‌های متداول کروماتوگرافی [1].

نوع فاز متحرک فاز ساکن
گاز- مایع گاز مایع جذب شده روی جامد
گاز- جامد گاز جامد
زوج یون مایع مایع
تبادل یون مایع رزین تبادل یون
مایع- مایع مایع مایع جذب شده روی جامد
مایع – جامد مایع جامد
لایه نازک مایع جامد
کاغذ مایع مایع روی کاغذ جامد
دفع بر اساس اندازه مایع ژل
کروماتوگرافی فوق بحران مایع فوق بحرانی گونه‌های آلی متصل به سطح جامد
 
کروماتوگرافی مایع یکی از انواع کروماتوگرافی است که فاز متحرک در آن مایع است. کروماتوگرافی گازی نیز روش دیگری است که در آن فاز متحرک گاز است. اگر فاز متحرک گاز و فاز ساکن مایع باشد، روش را کروماتوگرافی گاز- مایع می‌نامند. روش‌های کروماتوگرافی گاز- جامد، مایع- مایع و مایع- جامد نیز وجود دارند.
کروماتوگرام ، نموداری از پاسخ آشکارساز بر حسب زمان، حجم فاز متحرک یا فاصله است. اطلاعات مفیدی نظیر میزان پیچیدگی نمونه، تعداد اجزاء موجود در نمونه، مشخصات کیفی اجزای نمونه، درک کمی از درصد گونه‌ها موجود در نمونه و مشخصه‌های کارایی ستون، به سادگی از کروماتوگرام قابل حصول هستند.
در HPLC اغلب از ستون‌های پر شده با ذرات ریز فاز ساکن استفاده می‌شود. به همین علت سطح بیشتری از فاز ساکن در ستون در معرض اجزاء نمونه قرار می‌گیرد و در نتیجه راندمان جداسازی در این روش بیشتر از سایر روش‌های کروماتوگرافی است.
در سیستم HPLC با استفاده از یک سوزن مخصوص وارد پیش ستون مربوطه می‌شود. هم‌ زمان از یک حلال مخصوص جهت ترکیب شدن با نمونه استفاده می‌شود. سپس نمونه با حلال مورد نظر ترکیب شده و وارد ستون مربوطه می شود و بر اساس میزان قطبیت حلال و ترکیب از یکدیگر جدا می‌شوند. همچنین نمونه بر اساس زمان بازداری از یکدیگر تفکیک می‌شوند. شکل زیر اجزای یک سیستم HPLC را نشان می‌دهد [1].

شکل 1- اجزا سیستم HPLC

 کاربردها:
1- جداسازی، خالص سازی و شناسائی پروتئین ها و ترکیبات آلی بویژه ترکیبات داروئی. همچنین در برخی از آزمایش های مربوط به تعیین غلظت داروها مورد استفاده قرار می گیرد [2].
2-در تحقیقات پروتومیک (تحقیقاتی که برروی پروتئین ها انجام می شود)، آنالیز و هضم پروتئین [2]
3-تعیین ساختار پلیمرها [3]
4-مقایسه ساختارهای پروتئین های مختلف [4]
مراجع

[1].D. A. Skoog, D. M. West Holt, "Principle of Instrumental Analysis", Saunders College Publishing, Sixth edition, 1994.
[2]. Goran Mitulović • Marek Smoluch • Jean-Pierre Chervet • Ines Steinmacher • Andreas Kungl, "An improved method for tracking and reducing the void volume in nano HPLC–MS with micro trapping columns", Analytical and Bioanalytical Chemistry , 2047,2, 2003.
[3]. Kevin Killeen, Hongfeng Yin, Dan Sobek, Reid Brennen and T. van de Goor, CHIP-LC/MS: HPLC-MS USING POLYMER MICROFLUIDICS, 7th international Conference on Miniaturized Chemical and Blochemlcal Analysts Systems, Squaw Valley, California USA, October 5-9, 2003.
[4]. Martin Vollmer. Edgar Nagele, Patric Horth, "Different Proteome Analysis: Two-Dimensional Nano-LC/MS of E. Coil Proteome Grown on Different Carbon Sources", J. Bimolecular Techniques, 14, 128-135, 2003

ضمیمه1 – لیست HPLC های موجود در کشور


  دستگاه

كروماتوگرافی مایع با كارائی بالا (HPlC)
High Performance liquid chromatography 

ردیف

دانشگاه

مدل

نوع عضویت

1 پژوهشكده ابن سینا مركز تحقیقات بیولوژی، بیوتكنولوژی

2150-52

عضو

2  دانشگاه علوم پزشكی تهران آززمایشگاه فارماكولوژی

1100

عضو

3 پژوهشكده جهاد كشاورزی  شیمی و پلیمر

6A

عضو

4  دانشگاه علوم پزشكی تهران دانشكده داروسازی

-

عضو

5 دانشگاهعلوم پزشكی شهید بهشتی نانوتكنولوژی دانشگاه

S-7000HSM

عضو
6 دانشگاه شهید بهشتی  پژوهشكده گیاهان و مواد اولیه داروئی

-

عضو
7 پژوهشگاه صنعت نفت

600E95/0 LC-9A

عضو
8 پژوهشگاه بیوتكنولوژی كشاورزی نانوبیوتكنولوژی كشاورزی

K-1001

عضو
9 دانشگاه امیر كبیر پلیمر و تحقیقات شیمیایی

-

رزرو
10 دانشگاه تبریز دانشكده شیمی

-

رزرو
11 دانشگاه علوم پزشكی مشهد

VP

رزرو
 
ضمیمه2 – لیست مدل های HPLC
دستگاه  
ردیف

مدل

شرکت

كشور

1 K-2500 Knauer Knauer    
2 1100 series Cecil England    
3 ATi unicam Unicam England    
4 Klool Knauer Knauer    
5 D-7000 Hitachi Unite State
 

How did the Achilles tendon get it's name?
چهارشنبه 11 مرداد 1396 02:53 ق.ظ
It is the best time to make some plans for the future
and it's time to be happy. I've read this post and if I could I want to suggest you some interesting
things or advice. Maybe you can write next articles referring
to this article. I wish to read more things about it!
Elisha
سه شنبه 10 مرداد 1396 08:37 ب.ظ
Hello there, You have done an excellent job. I'll certainly digg it and
personally suggest to my friends. I'm sure they'll be benefited from this website.
Thurman
دوشنبه 25 اردیبهشت 1396 09:40 ق.ظ
I am truly pleased to glance at this webpage posts which includes
lots of useful data, thanks for providing these data.
 
لبخندناراحتچشمک
نیشخندبغلسوال
قلبخجالتزبان
ماچتعجبعصبانی
عینکشیطانگریه
خندهقهقههخداحافظ
سبزقهرهورا
دستگلتفکر

درباره وبلاگ

این وبلاگ متعلق به باشگاه پژوهشگران جوان دانشگاه آزاد اسلامی یزد می باشد.این وبلاگ سعی دارد تا با کمک نویسندگان آن بتواند در زمینه های مختلف راهگشای محققین و پژوهشگران باشد.
مدیر وبلاگ : محمد رضا احمدزاده

آخرین پست ها

جستجو

نظرسنجی

  • این وبلاگ را چگونه ارزیابی می کنید ؟






نویسندگان

دریافت کد فال حافظ

دیکشنری آنلاین

دیکشنری آنلاین

كد عكس تصادفی

کد نمایش آب و هوا کد نمایش آب و هوا